воскресенье, 28 сентября 2014 г.

Вирусная нагрузка

Есть три методики анализа, помогающие идентифицировать вирусы - хламидии, уревплазмы, микоплазмы и др.
1.Полимеразная цепная реакция. - ПЦР
 полимеразная цепная реакция позволяет определить ДНК, которая подверглась влиянию вируса и содержит встроенную им наследственную информацию. Что бы исследование стало возможным, потребуется взять кровь из вены, подойдет также моча, мокрота, исследуется слюна или соскоб из уретры или цервикального канала, впрочем, все, что может содержать ДНК человека.

Диагностика гепатита С. Вирусная нагрузка
Вирусная нагрузка это анализ, который измеряет количество РНК(рибонуклеиновая кислота, генетический материал) вируса гепатита С в единице объема крови.
Наличие вирусной РНК, как правило, означает активную репликацию вируса (вирус размножается и заражает новые клетки). Раньше вирусная нагрузка измерялась в количестве копий в миллилитре крови, но с недавнего времени принято измерять вирусную нагрузку в Международных Единицах на миллилитр крови (МЕ/мл).
Виды анализов на вирусную нагрузку:
Качественный анализ. Качественный анализ показывает наличие РНК вируса гепатита С в крови без оценки количества. Этот тест обычно используется для подтверждения наличия вируса в крови. Положительный результат означает, что вирус в крови есть, отрицательный, соответственно, что вируса в крови нет.

Количественный анализ. Этот тест показывает не только наличие вируса в крови, но и его количество. Этот параметр, хоть и не влияет прямо на тяжесть течения болезни, однако от него может зависеть тактика лечения.

На данный момент существует три метода, широко применяемых для определения вирусной нагрузки:

Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Очень чувствительный тест, позволяющий определить вирусную нагрузку не менее 50 МЕ/мл.

Метод разветвленной ДНК. Более дешевый и быстрый анализ. Порог чувствительности
составляет порядка 600 МЕ/мл, иными словами, если вируса в крови меньше 600 МЕ/мл – тест даст отрицательный результат.

Транскрипционная амплификация (TMA). Эта методика, основанная на определении нуклеиновых кислот в исследуемой крови, имеет достаточно высокую чувствительность (5-10 МЕ/мл).

Единицы измерения.

На сегодняшний день, стандартной единицей измерения вирусной нагрузки принято считать МЕ (Международные Единицы), однако в некоторых лабораториях результат приводится в количестве копий (копий/мл). Соотношение между МЕ и количеством копий различно для разного оборудования. Уточните коэффициент перевода в своей лаборатории.

Формат представления результата.

Экспоненциальный формат. Часто результат представляется в виде числа умноженного на 10 в определенной степени. Например 3,6 * 106 МЕ/мл, что соответствует 3 600 000 МЕ/мл.

Логарифмический формат. Иногда результат анализа вирусной нагрузки представляется в логарифмической форме, например 6,24, что соответствует 1 750 000 МЕ/мл (log(1750000)=6.24)

Как понять результат?

Вирусная нагрузка может быть высокой или низкой.

Вирусная нагрузка считается высокой, если результат больше 800 000 МЕ/мл (2 000 000 копий в мл).

Низкой считается вирусная нагрузка менее 800 000 МЕ/мл (2 000 000 копий/мл).

Зачем нужно знать вирусную нагрузку?

Вирусная нагрузка имеет большое значение для оценки эффективности противовирусной терапии. Так же, этот параметр помогает в выработке тактики лечения. Некоторые ученые считают, что при высокой вирусной нагрузке повышается шанс передачи гепатита С от матери ребенку, а так же половым путем.

Подтверждение положительного результата ИФА тестов. Анализ на антитела к вирусу гепатита С иногда дают ложноположительный результат, так бывает, когда организм имел контакт с вирусом, выработал антитела и справился с вирусом самостоятельно. Антитела сохраняются в крови достаточно долгое время, однако самого вируса в организме нет. Поэтому, для подтверждения положительного результата ИФА теста, всегда назначают анализ на вирусную нагрузку.

До лечения. Уровень вирусной нагрузки до лечения поможет врачу определить необходимые дозировки интерферона и рибавирина.
Во время лечения. Снижение вирусной нагрузки во время противовирусной терапии, говорит об эффективности лечения. Если вирус не определяется в крови на 4ой неделе терапии – констатируется быстрый вирусологический ответ, что позволяет прогнозировать общий успех лечения.

После лечения. Анализ на вирусную нагрузку после лечения позволяет исключить/обнаружить рецидив. Если вирус в крови не обнаруживается в течении 24 недель после окончания терапии – констатируется устойчивый вирусологический ответ, именно УВО является показателем успешного лечения и его непосредственной целью.

В заключение, стоит обратить внимание на тот факт, что на данный момент не выявлено прямой связи между уровнем вирусной нагрузки и тяжестью течения хронического гепатита С.


Гены рака молочной железы


выявление мутаций в генах BRCA1, BRCA2, СНЕК2 и NBS1 не является установлением или подтверждением диагноза онкологического заболевания; однако риск развития заболевания в течение жизни у женщин-носительниц мутаций составляет от 60 до 90%;
выявление мутаций в генах BRCA1 BRCA2, СНЕК2 и NBS1 у мужчин также свидетельствует о предрасположенности к некоторым злокачественным новообразованиям.


Ген CHEK2 (CHECKPOINT KINASE 2) кодирует синтез белка-фермента чекпойнт-киназы 2. Белковый продукт гена CHEK2 участвует в поддержании стабильности генома, контролирует процессы клеточного деления и репарации ДНК. Фермент активируется в ответ на повреждение молекулы ДНК, блокируя клеточный цикл в фазе G1 или запуская процесс апоптоза, выступая в качестве супрессора злокачественной трансформации клеток. Мутации гена CHEK2 приводят к синтезу неполноценного укороченного белка и ассоциированы с возникновением наследственных форм рака молочной железы.

Мутации с.1100delC, IVS2+1G>A гена CHEK2 являются наиболее распространенными. Частота аллеля 1100delC в европейской популяции составляет 1,1–1,4%. Среди российских пациенток частота встречаемости аллеля 1100delC составляет 2-5%. Риск возникновения рака молочной железы у женщин–носительниц мутации 1100delC увеличивается в 1,4–4,7 раза. Мутация IVS2+1G>A гена CHEK2 более редкая, по сравнению с c.1100delC, чаще встречается у представительниц Белоруссии, Польши, Германии и Северной Америки. Аллель IVS2+1G>A CHEK2 ассоциирован с возникновением онкологической патологии различной локализации, чаще всего встречается у больных раком молочной железы.

Мутации гена CHEK2 наследуются по аутосомно-доминантному типу, передаются из поколения в поколение с вероятностью 50%. Встречаются с одинаковой частотой у мужчин и женщин. Вероятность возникновения болезни повышается даже при наличии одной мутации в гетерозиготной форме.


Ген NBS1 (NIJMEGEN BREAKAGE SYNDROME) кодирует белок нибрин, который участвует в регуляции клеточного цикла, играет важную роль в восстановлении ДНК. Мутация c.657del5 в гене NBS1 в гомозиготном состоянии ассоциирована с развитием наследственного синдрома хромосомных поломок («Nijmegen breakage syndrome»). Гетерозиготное носительство мутаций NBS1 наблюдается преимущественно у славян и ассоциировано с повышенным риском развития рака молочной железы. Частота встречаемости мутации c.657del5 в славянской популяции составляет 0,5-0,7%.